目的 观察创伤愈合过程中单核巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte／macrophage colony—stimulating factor，GMCSF）经ERK通路活化核因子（nuclear factor，NF）-κB诱导创伤后人皮肤成纤维细胞（human dermal fibroblasts，HDFs）生成血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），并探讨相关机制。方法分离培养创伤部位HDFs，并用GMCSF处理。作用不同时间后，采用RT—PCR和ELISA分别检测HDFs VEGF mRNA和蛋白水平；应用GMCSF作用HDFs后，采用Western blot观察ERK磷酸化水平的改变；进一步应用ERK通路特异性抑制剂PD98059预处理HDFs。再用GMCSF刺激已预处理过的细胞，收集细胞和上清液，采用Western blot检测VEGF蛋白水平的变化；进一步通过抑制ERK信号通路，采用免疫荧光检测NF—κB的活化。另外，应用核质抽提试剂盒分离胞质和胞核，采用Westem blot检测NF—κB的活化。结果随着GMCSF浓度的增加，VEGF mRNA及蛋白水平也逐步增加，呈一定的剂量依赖性；GMCSF作用于HDFs2h后，VEGF mRNA水平开始升高，至4～6h达到峰值。GMCSF能够显著活化ERK磷酸化过程；与GMCSF组相比，ERK信号通路特异性抑制剂PD98059能显著抑制GMCSF诱导VEGF的表达（P〈0．05）。免疫荧光和Western blot结果显示，抑制ERK后NF—κB的活化受到显著抑制。结论GMCSF可通过ERK信号通路活化NF—κB从而诱导HDFs VEGF的表达。