pvdQ基因对铜绿假单胞菌群集运动的作用

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目的 探讨铜绿假单胞菌pvdQ(PA2385)基因对群集运动的作用.方法 构建pvdQ基因表达质粒pME6032-pvdQ并鉴定,采用电穿孔法将带有pvdQ基因的质粒转入铜绿假单胞菌野生株PAO1中,构建pvdQ-高表达株.同时将空质粒pME6032采用电穿孔法转入PAO1中,构建pME6032空质粒株.选择含有反向筛选基因sacB的pEX18Gm质粒作为自杀载体,构建缺失pvdQ基因的铜绿假单胞菌无痕缺失突变株,溶菌肉汤(LB)液过夜培养,观察菌株的直径变化.统计学处理采用单因素方差分析.结果 经鉴定,成功构建pvdQ-高表达株和pvdQ-突变株,比较4株菌的群集运动直径变化:PAO1为(20.52±1.80)mm,pME6032空质粒株为(19.39±2.10)mm,pvdQ-高表达株为(51.20±2.16)mm,pvdQ-突变株为(3.30±0.55)mm.pME6032空质粒株与野生株PAO1相比,直径无显著变化(t=-0.1493,P>0.05),pvdQ-突变株与野生株PAO1相比,直径减小(t=2.8525,P<0.05),pvdQ-高表达株与野生株PAO1相比,直径增大(t=1.4230,P<0.05).结论 pvdQ基因参与调控铜绿假单胞菌群集运动,且能促进铜绿假单胞菌群集运动。

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