目的利用特异性与灵敏性较高的神经元特异烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)肺癌相关标志物,研制肺癌双显色的体外联合诊断酶联免疫反应(ELISA)试剂盒。方法将NSE、CYFRA21-1两种抗体按一定比例组合包被到酶标板的板底制成试剂盒。分别以NSE、CYFRA21-1抗原为研究对象,对包被液、包被时间、包被温度因素进行考察,以试剂盒的稳定性、灵敏度、准确性为指标进行结果分析。结果 NSE、CYFRA21-1肺癌双显色ELISA诊断试剂盒4℃放置时有效期为6个月。试剂盒灵敏度为83.8%(129/154),特异度为53.8%(57/106),准确性为71.5%(186/260),受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积Az为0.90,各项指标均较单独的NSE、CYFRA21-1明显提高。结论成功制备双显色ELISA肺癌诊断试剂盒,该试剂盒可提高肺癌检查的准确性、灵敏度,降低假阳性率,具有开发为新型肺癌诊断试剂盒的条件。