粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白的原核表达及纯化

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目的原核表达纯化粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白,为粪肠球菌心内膜炎的致病机制研究及临床血清学诊断奠定基础。方法从粪肠球菌中扩增efaA基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET30a中,构建pET30a—efaA重组质粒。经BamhI、XhoI酶切及测序鉴定,将pET30a—efaA质粒转化入BL21(DE3)。以IPTG诱导BL21(DE3)表达daA融合蛋白,亲和层析纯化重组蛋白,SDS—PAGE、Western Blot分析鉴定。结果PCR体外扩增eraA基因产物约943bp,重组表达质粒pET3
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