烟草抗PVYN突变株SN01的SRAP—PCR反应体系的建立与优化

来源 :中国烟草科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：JESSEA11

【摘要】

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采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素（dNTPs、Mg2＋、TaqDNA聚合酶、引物和DNA）进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明，在20μL

【作者】

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李杰朱丹李颖安梦楠赵秀香吴元华

【机构】

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沈阳农业大学植物保护学院,辽宁省抚顺市农业技术推广中心

【出处】

：

中国烟草科学

【发表日期】

：

2013年6期

【关键词】

：

烟草抗PVYN突变株 SRAP-PCR 体系优化 tobacco mutant with resistant to pVyN sequence-relat

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采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素（dNTPs、Mg2＋、TaqDNA聚合酶、引物和DNA）进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明，在20μL的反应体系中，各因素的最佳加入量分别是：dNTPs（2．5mmol／L）3．2μL、Mg2＋（25mmol／L）1．6μL、TaqDNA聚合酶（2．5u／μL）0．16μL、引物（10μmaol／L）0．6gL、DNA模板120ng。对该SRAP—PCR反应程序中的退火温度和循环次数筛选表明，最佳退火

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