【摘 要】
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目的 建立人脊索瘤细胞系,为今后深入开展脊索瘤的研究奠定基础.方法 手术获得新鲜人脊索瘤组织标本,经机械法和反复贴壁法进行原代培养和细胞纯化,接种到DMEM/F-12的培养基中进行传代培养,稳定传代15代.相差显微镜观察细胞的形态变化,透射电镜观察细胞器特点,免疫组化S100、Galectin-3、Fascin-1、Brachyury染色检测脊索瘤特异性标准蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期、吉姆
【机 构】
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100050首都医科大学附属北京天坛医院神经外科,北京市神经外科研究所,北京市神经外科研究所,首都医科大学,首都医科大学,首都医科大学,100050首都医科大学附属北京天坛医院神经外科,北京市神经外科
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目的 建立人脊索瘤细胞系,为今后深入开展脊索瘤的研究奠定基础.方法 手术获得新鲜人脊索瘤组织标本,经机械法和反复贴壁法进行原代培养和细胞纯化,接种到DMEM/F-12的培养基中进行传代培养,稳定传代15代.相差显微镜观察细胞的形态变化,透射电镜观察细胞器特点,免疫组化S100、Galectin-3、Fascin-1、Brachyury染色检测脊索瘤特异性标准蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期、吉姆萨染色体核型分析,裸鼠皮下注射验证细胞的成瘤性.结果 相差显微镜下细胞内可见大量空泡状结构,电镜下胞质内为大量低电子密度的黏液空泡,免疫组化染色S100、Galectin 3、Fascin-1、Brachyury蛋白均呈阳性表达,流式细胞术检测细胞周期各时相的百分率分别为G1期51.3％、S期23.6％、G2-M期25.0％、G2/G1≈2,染色体核心分析细胞为异倍体核型,细胞注入裸鼠皮下有肿瘤形成.结论 成功建立脊索瘤细胞系HBC2,长期传代后仍能保持脊索瘤细胞特性。
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