穿梭质粒pWB的构建、鉴定及初步运用

来源 :中华医学遗传学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rui6372472
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构建了一种用于诱变剂检测及诱变机理分析的、基于Epstein-Barr病毒的穿梭质粒pWB。该质粒以SupF为靶基因、Neo为标记基因,便于转化克隆与突变子的筛选,以及突变靶基因的序列分析。构建的质粒通过酶谱分析、序列分析及其细菌、细胞生物学功能的检测,确认完全符合设计要求。采用电穿孔法将其转染入新生儿羊膜细胞系FL细胞中,转染效率高于5×10-4。选出的转化子亚克隆细胞系细胞经过4个月的传代培养后仍很稳定,自发突变率低于10-5。该质粒可望成为在分子水平研究诱变机理的有力工具。

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