【摘 要】
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以大豆叶片为材料,比较分析了3种蛋白质的提取方法,讨论了等电聚焦时间和染色方法等关键因素对双向电泳的影响,同时选择不同的IPG胶条,设定了第1向等电聚焦和第2向SDS-PAGE电
【机 构】
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东北农业大学大豆研究所教育部大豆生物学重点实验室,
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以大豆叶片为材料,比较分析了3种蛋白质的提取方法,讨论了等电聚焦时间和染色方法等关键因素对双向电泳的影响,同时选择不同的IPG胶条,设定了第1向等电聚焦和第2向SDS-PAGE电泳的电泳程序及参数。结果表明:采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质,选择pH 4~7(17 cm)IPG胶条,适当延长和改变等电聚焦的第2步和第3步的时间和参数,并且用考马斯亮蓝和银染复合染色法对12%的凝胶进行染色,能够获得清晰蛋白点的双向电泳图谱,说明优化出的双向电泳技术更加适合于大豆叶片总蛋白质分离。
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