慢病毒载体介导的层黏连蛋白受体稳定抑制细胞株的建立

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目的:构建靶向层黏连蛋白受体(LR)基因的小发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体,鉴定其对LR的抑制效果,并筛选LR稳定抑制的HeLa细胞株。方法:设计针对LR的shRNA序列,将此序列和H1启动子克隆入含有EGFP报告基因的pLenti6/v5慢病毒表达载体,通过病毒包装、细胞感染、抗生素筛选获得稳定细胞株,用real-time PCR和Western印迹检测筛选得到的稳定细胞株中LR的表达水平。结果和结论:构建了含有LR靶向shRNA的慢病毒表达载体,包装成病毒后感染HeLa细胞,经抗生素筛选后获得
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