【摘 要】
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目的:探讨TLR4基因敲除对哮喘小鼠气道炎症的影响及其意义.方法:利用卵清白蛋白(OVA)腹腔注射、雾化激发野生型(WT)和TLR4基因敲除(TLR4?/?)小鼠,分别建立小鼠哮喘模型;观察比较各组小鼠行为变化,HE染色观察肺组织病理切片,ELISA法检测BALF中IL-4、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β、TSLP,Western blot检测肺组织中GATA-3、T-bet、RORγt、Foxp3及OX40L蛋白水平,RT-PCR法观察GATA-3、T-bet、RORγt、Fo
【机 构】
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上海中医药大学附属市中医医院,上海200071
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目的:探讨TLR4基因敲除对哮喘小鼠气道炎症的影响及其意义.方法:利用卵清白蛋白(OVA)腹腔注射、雾化激发野生型(WT)和TLR4基因敲除(TLR4?/?)小鼠,分别建立小鼠哮喘模型;观察比较各组小鼠行为变化,HE染色观察肺组织病理切片,ELISA法检测BALF中IL-4、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β、TSLP,Western blot检测肺组织中GATA-3、T-bet、RORγt、Foxp3及OX40L蛋白水平,RT-PCR法观察GATA-3、T-bet、RORγt、Foxp3 mRNA水平.结果:与野生对照组小鼠相比,野生哮喘组小鼠肺组织及气管周围可见嗜酸性粒细胞、中性粒细胞等大量炎症因子浸润,上层基底膜增厚;BALF中IL-4、IL-6、IL-17、TGF-β、TSLP浓度明显升高,IFN-γ、IL-10浓度显著降低(P<0.01);肺组织中GATA-3、RORγt、OX40L蛋白表达显著增高(P<0.01),T-bet、Foxp3蛋白表达显著降低(P<0.01);GATA-3、RORγt mRNA水平显著上升(P<0.01),T-bet、Foxp3 mRNA水平显著降低(P<0.01).与野生哮喘组小鼠相比,TLR4基因敲除组哮喘小鼠肺组织炎症程度明显减轻,少见炎症因子浸润;BALF中IL-4、IL-6、IL-17、TGF-β、TSLP浓度明显降低(P<0.01),IFN-γ、IL-10浓度明显升高(P<0.01);肺组织中GATA-3、RORγt、OX40L蛋白表达明显降低(P<0.01),GATA-3、RORγt mRNA水平明显降低(P<0.01),T-bet、Foxp3蛋白表达及mRNA水平明显升高(P<0.01,P<0.05).结论:TLR4敲除可减轻哮喘模型小鼠气道炎症,其机制可能与TSLP浓度降低,OX40L水平下调,Th1/Th2、Th17/Treg失衡被纠正有关.
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