【摘 要】
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目的:探讨白介素-27(interleukin-27,IL-27)对人成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS)的体外活化效应及细胞内信号传导机制。方法:IL-27处理FLS后,酶联免疫吸
【机 构】
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重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上资助项目(编号:81370110)
论文部分内容阅读
目的:探讨白介素-27(interleukin-27,IL-27)对人成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS)的体外活化效应及细胞内信号传导机制。方法:IL-27处理FLS后,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平的变化;信号通路抑制剂处理FLS后1 h,用IL-27刺激FLS 48 h,ELISA检测细胞上清液中IL-6的水平变化;Western blot检测IL-27刺激FLS不同时间细胞内信号通路蛋白的磷酸化水平。结果:IL-27能刺激正常关节来源的FLS(N-FLS)和RA患者关节来源的FLS(RA-FLS)产生IL-6,IL-27(50 ng/m L)刺激N-FLS产生的IL-6水平[(1329.10±113.15)pg/m L]和刺激RA-FLS产生的IL-6水平[(1 583.70±129.54)pg/m L]较其阴性对照明显升高(P=0.001,P=0.001)。用不同浓度(0、10、20、50、100 ng/m L)IL-27分别处理2种细胞不同时间(0、12、24、48 h),产生IL-6的水平随浓度和时间增加而升高,具有时间和剂量依赖性。JAK抑制剂AG490和JNK抑制剂SP600125可显著抑制IL-27诱导N-FLS和RA-FLS产生IL-6。IL-27刺激N-FLS和RA-FLS后,细胞内信号通路蛋白JAK2和JNK的磷酸化水平明显升高(JAK2:F=303.000,P=0.000;F=640.400,P=0.000;JNK:F=98.840,P=0.000;F=54.820,P=0.001)。结论:IL-27可通过激活FLS细胞内JAK2和JNK信号通路上调FLS产生IL-6水平,从而增强关节滑膜的炎症反应。
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