【摘 要】
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植物有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)参与调控植物低温胁迫应答，但橡胶树中MAPK同源蛋白NTF4至今未被克隆与鉴定，克隆和研究HbNTF4的功能对
【机 构】
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海南大学热带作物学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31560197)资助
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植物有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)参与调控植物低温胁迫应答，但橡胶树中MAPK同源蛋白NTF4至今未被克隆与鉴定，克隆和研究HbNTF4的功能对橡胶耐寒品种的选育具有重要意义。本研究成功从橡胶树cDNA中克隆出HbNTF4基因，氨基酸序列分析表明HbNTF4与其他物种序列同源性很高。通过qRT-PCR发现橡胶树4℃处理后HbNTF4基因表达量上升。将HbNTF4构建至原核表达载体pET-28a上，在Escherichia coli BL21 (DE3)中诱导并成功纯化出HbNTF4重组蛋白。SDS-PAGE电泳检测表明HbNTF4在37℃诱导8 h，IPTG浓度为0.2 mmol/L的条件下最优，最后成功纯化出符合预期大小的可溶性蛋白，为深入研究HbNTF4的生物学功能提供了理论依据。
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