凝血因子VIII cDNA的克隆及分子裁剪

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凝血因子VIII (F VIII)基因的分子克隆是制备重组因子F VIII (r F VIII)及进行甲型血友病基因治疗的基础。本研究采用基因组DNA的PCR扩增,mRNA的逆转录酶/聚合酶链反应(RT/PCR)扩增以及基因组DNA文库的筛选等多种技术,得到了编码F VIII的全部cDNA片段,并剪接成了可供表达的两种F VIII cDNA分子:一种包括F VIII全部编码序列,长7828bp。另一种是缺失编码大部分B结构域及部分轻链N端的缺失型,长5323bp。

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