观察特异性微小RNA181b(miR-181b)对胰腺癌PANC-1细胞增殖和侵袭的影响。
方法应用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测3种人胰腺癌细胞株PANC-1、BXPC-3、ASPC-1和正常胰腺HTERT-HPNE细胞中miR-181b表达情况。通过RT-qPCR观察50 nmol/L miR-181b inhibitor对胰腺癌PANC-1细胞miR-181b表达的影响，通过噻唑蓝(MTT)法观察miR-181b inhibitor对胰腺癌PANC-1细胞的增殖影响，通过Transwell法测定miR-181b inhibitor对胰腺癌细胞侵袭的影响，生物信息学预测并通过荧光素酶活性检验miR-181b的靶向基因磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)，应用RT-qPCR检测miR-181b inhibitor对PTEN，基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达的影响。
结果miR-181b在PANC-1(2.84±0.16)、BXPC-3(1.74±0.18)、ASPC-1(2.21±0.20)细胞中的表达明显高于正常HTERT-HPNE细胞(1.00±0.06)。PANC-1细胞转染miR-181b inhibitor后，细胞增殖无明显变化(P>0.05)，侵袭率明显受抑制(P<0.01)。生物信息学预测PTEN可能是miR-181b靶向基因，荧光素酶实验显示转染miR-181b mimics后野生型PTEN组荧光素酶活性下降39%，而突变型差异无统计学意义。转染miR-181b inhibitor后PETN上调(1.85±0.06比1.01±0.08，P<0.05)，MMP-2(0.59±0.02比1.01±0.04)和MMP-9(0.66±0.02比0.99±0.07)明显上调(P<0.05)。
结论miR-181b可能部分通过靶向PTEN影响MMP-2和MMP-9的表达促进胰腺癌细胞的侵袭性。