冷缺血期氢气膨肺对大鼠移植肺NLRP3炎症小体活性的影响

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目的

评价冷缺血期氢气膨肺对大鼠移植肺NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活性的影响。

方法

清洁级健康雄性Wistar大鼠56只,8~10周龄,体重250~300 g,其中24只大鼠作为供体。取32只大鼠为受体,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(Sham组)行侧开胸手术,但不进行肺移植术;肺移植组(LT组)供肺冷缺血期不膨肺,进行肺移植术;氧气组(O组)和氢气组(H组)供肺冷缺血期分别以5 ml/kg的40%氧气-60%氮气和3%氢气-40%氧气-57%氮气膨肺,每20 min置换1次,持续120 min后行肺移植术。于移植前、再灌注3、60和120 min(T0~T3)时行动脉血气分析,计算氧合指数(OI),记录pH值和碱剩余(BE)。T3时取血结束后,放血法处死大鼠,光镜下观察移植肺组织病理学结果,并行肺组织损伤评分(LIS),Western blot法测定移植肺NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-1 p20表达。

结果

与Sham组比较,LT组T1~3时OI、T2,3时pH值和BE降低,LIS升高,NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达上调(P<0.05);与LT组比较,O组和H组T2,3时OI和BE升高,O组T3时和H组T2,3时的pH值升高,LIS降低,H组NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达下调(P<0.05),O组NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达差异无统计学意义(P>0.05);与O组比较,H组T2,3时BE升高,LIS降低,NLRP3、ASC和caspase-1 p20表达下调(P<0.05),OI和pH值差异无统计学意义(P>0.05)。

结论

冷缺血期氢气膨肺减轻大鼠移植肺损伤的机制可能与抑制NLRP3炎症小体活性有关。

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