【摘 要】
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采用单因素梯度试验结合正交实验的方法(CTAB法),优化了苏铁类植物全基因组DNA提取工艺.研究表明:材料量对提取DNA的浓度、提取率和纯度的影响最为明显,但还没有达到显著水平;最
【机 构】
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郑州轻工业学院食品与生物工程学院,深圳市仙湖植物园科技部,河南省生物工程与技术研究中心
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采用单因素梯度试验结合正交实验的方法(CTAB法),优化了苏铁类植物全基因组DNA提取工艺.研究表明:材料量对提取DNA的浓度、提取率和纯度的影响最为明显,但还没有达到显著水平;最佳工艺参数为:20 mg苏铁羽片,65℃水浴处理30 min,抽提后,加入800 μL无水乙醇和5μL饱和NaCl溶液,6 000 r/min离心4 min沉淀DNA;溶解再沉淀后的DNA,质量浓度可达0.241 3 g/L,提取率可达0.483%,|OD260/OD280-1.8|<0.01,可以满足RAPD-PCR分子标记技
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