一种基于连续PMCA的PrP^Sc体外扩增方法的建立

来源 :病毒学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangyp2002
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为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrP^Sc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrP^Sc的扩增情况进行检测。结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrP^Sc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制。
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