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目的：观察前沿亲和色谱评价5种知母糖苷类化合物的α-淀粉酶抑制活性，探讨提升其检测效率的重要手段。方法：选择硅胶作为主要载体，通过制作α-淀粉酶专业亲和色谱柱，并采取循环伏安方法进行检测，对亲和色谱整体稳定性进行考察的基础上，选择前沿亲和色谱评价5种知母糖苷类化合物的α-淀粉酶抑制活性，寻找其优化手段。结果：5种知母糖苷类化合物的α-淀粉酶实际结合力具体排序是知母皂苷A-II＜知母皂苷B-III＜知母皂苷B-II＜芒果苷＜新芒果苷。结论：由于样品化合物的α-淀粉酶抑制活性和该排序结果之间存在着一致性，即前沿亲和色谱评价5种知母糖苷类化合物的α-淀粉酶抑制活性具有可行性，可推广。