均匀设计优化野生狗牙根的SRAP-PCR反应体系

来源 :中国农学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:enidzhangjuan
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采用均匀设计方法,对影响野生狗牙根SRAP-PCR体系的MgCl2、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶和模板浓度等进行了U16(4^5)和U2(3^5)两轮优化,建立了适用于野生狗牙根的SRAP-PCR反应体系。该优化的25μl反应体系包含MgCl2 3.5mmol/L,dNTPs 0.20nmol/L,引物0.44μmol/L,Taq DNA聚合酶1.50U,模板28ng/L。在此基础上又对退火温度进行了摸索,结果发现扩增结果对退火温度变化不敏感。最后运用优化体系对来自不同地区的10份野生狗牙根的1
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