人骨形态发生蛋白—2重组腺病毒的构建与制备

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhubin19851021
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将人BMP-2的编码区cDNA克隆至穿梭载体pShuttle,以PI-SceI和I-CeuI切下含BMP-2编码区cDNA的片断,在体外与PI-SceI/I-CeuI切开的腺病毒DNA连接,构建重组有BMP-2全长编码区基因的腺病毒DNA,PCR鉴定正确后,经PacI酶切线性化,在脂质体介导下转染HEK293细胞,反复冻融制备重组腺病毒,空斑形成试验测定病毒滴度约为7.5×106~1.5×107pfu/ml.以BMP-2重组腺病毒感染体外培养的小鼠成肌细胞C2C12,Western b
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