谷氨酰胺对人肺泡Ⅱ型上皮细胞热休克蛋白70表达的影响

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目的 评价谷氨酰胺对人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞热休克蛋白(HSP)70表达的影响.方法 取人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞,在不含谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育24 h作为空白对照组(C组),43℃孵育1 h、37℃恢复4 h作为阳性对照组(PC组),不同浓度(2、4、8、12和16 mmol/L)谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育24 h作为不同浓度谷氨酰胺诱导组(Gln2组、Gln4组、Gln8组、Gln12组和Gln16组),8 mmol/L谷氨酰胺的DMEM培养液中孵育不同时间(1、2、6、12、24和48 h)作为不同时间谷氨酰胺诱导组(T1组、T2组、T3组、T4组、T5组和T6组).分别采用RT-PCR和Western blot法检测HSP70 mRNA和蛋白的表达.结果 与C组比较,PC组和不同浓度谷氨酰胺诱导组人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞HSP70 mRNA和蛋白的表达均升高,Gln8组HSP70 mRNA和蛋白表达水平高于Gln2组、Gln4组、Gln12组和Gln16组(P<0.01),而与PC组相比差异无统计学意义(P>0.05).与C组比较,PC组和不同时间谷氨酰胺诱导组HSP70 mRNA和蛋白的表达均升高,T5组HSP70 mRNA和蛋白表达水平高于T1组、T2组、T3组、T4组和T6组(P<0.01),而与PC组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 谷氨酰胺可明显上调体外培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞HSP70 mRNA和蛋白的表达,并呈浓度和时间依赖性.
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