【摘 要】
：
目的 观察沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达对于缺氧微环境下人胰腺癌BxPC-3细胞株中糖酵解相关基因表达的影响.方法 通过合成小于扰RNA((siRNA))转染沉默BxPC-3细胞株中HIF-1α基因表达.将细胞分为空白对照组(BxPC-3)、空白质粒转染对照组(GFP)和HIF-1α基因沉默组(sh-HIF-1α),分别在正常环境(21.0％O2)和缺氧环境(0.5％～1.0％ O2)中
【机 构】
：
200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海,复旦大学附属中山医院普外科,200032上海
论文部分内容阅读
目的 观察沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达对于缺氧微环境下人胰腺癌BxPC-3细胞株中糖酵解相关基因表达的影响.方法 通过合成小于扰RNA((siRNA))转染沉默BxPC-3细胞株中HIF-1α基因表达.将细胞分为空白对照组(BxPC-3)、空白质粒转染对照组(GFP)和HIF-1α基因沉默组(sh-HIF-1α),分别在正常环境(21.0％O2)和缺氧环境(0.5％～1.0％ O2)中培养48 h后,检测各组细胞中糖酵解相关基因[如丙酮酸激酶1(PDK-1)、乳酸脱氢酶A(LDH-A)和柠檬酸合成酶(CS)]的表达以及细胞糖酵解产物乳酸含量的改变.结果 与正常环境比较,缺氧培养后sh-HIF-1α组细胞内HIF-1αmRNA增加了12.4％,蛋白增加了1.6倍,显著低于BxPC-3组和GFP组(P＜0.05),PDK-1和LDH-A的表达也明显低于两个对照组(P＜0.05).相应的sh-HIF-1α组的乳酸含量为(4.8 ±0.3)nmol/106个细胞,明显低于BxPC-3组(9.1±0.5)nmol/106个细胞和GFP组(9.2±0.5) nmol/106个细胞(P＜0.05).相反,缺氧时BxPC-3组和GFP组细胞中与线粒体氧化磷酸化相关的CS基因表达明显下降,低于其在sh-HIF-1α组细胞中的表达(P＜0.05).结论 缺氧可以诱导BxPC-3细胞株中HIF-1α基因高表达并促进糖酵解相关的PDK-1和LDH-A等基因表达.而通过沉默HIF-1α基因,可以抑制上述基因的表达,并促进CS基因表达,从而抑制肿瘤细胞的糖酵解代谢。
其他文献
表观遗传对小分子核糖核酸(microRNA)的表达方式以及肿瘤的诱发起着重要的调控作用.microRNA受甲基化和组蛋白修饰等经典表观遗传机制调控[1],另一方面microRNA对DNA(脱氧核糖核酸)甲基化也能够产生一定的调节作用[2].鉴于microRNA与DNA甲基化在肿瘤发生发展过程中的共同作用,现阐述microRNA与DNA甲基化的相互关系在基因表达调控、肿瘤形成以及在抗肿瘤领域内应用研
DNA双链断裂(DSBs)是真核生物后果最严重的DNA损伤之一[1].如果DSBs不能及时而准确地修复,可能导致基因突变、基因组不稳定、细胞凋亡甚至癌症的发生[2].磷酸化H2AX(γ-H2AX)是启动DSBs修复的关键因子,其在维持基因组稳定性方面具有重要作用[3].已有研究结果表明γ-H2AX在多种肿瘤中异常表达,但在胃癌中的研究不多本研究旨在观察γ-H2AX在胃癌的表达,并探讨其临床意义.一
1．统计学符号：按GB3358．1982（（统计学名词及符号》的有关规定，统计学符号一律采用斜体。
目的 观察骨巨细胞瘤组织中人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,并探讨其临床意义.方法 选择我院2008年1月至2011年12月病理科保存的标本,标本中骨巨细胞瘤84例、骨质增生骨组织32例、异位骨化组织28例,对照组为正常骨组织20例；采用原位分子杂交技术检测和定位标本中的端粒酶hTERT基因,并用图像分析系统分析其表达水平.、结果 端粒酶hTERT基因在骨巨细胞瘤组织中的表达阳性率为46.
目的 比较大鼠下腔静脉的不同处理方法,建立深静脉血栓形成(DVT)动物模型.方法 将SD大鼠72只随机分为A、B、C、D4组,即分别采用假手术、单纯结扎下腔静脉、结扎下腔静脉+结扎肾静脉至髂静脉水平的下腔静脉分支、缩窄下腔静脉+血管夹阻断下腔静脉+结扎肾静脉至髂静脉水平的下腔静脉分支,每组18只,于术后1、3、7d,分别处死各组大鼠6只,比较各组血栓形成情况,并行病理学分析.结果 在术后1、3、7
目的 观察腺病毒介导的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)基因联合转染对大鼠脂肪来源干细胞成骨分化的影响.方法 分别构建携带绿色荧光蛋白的BMP-2重组腺病毒表达质粒及携带红色荧光蛋白的BMP-7的重组腺病毒表达质粒,包装、生产携带BMP-2和BMP-7的腺病毒.分离并培养大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs),分别以Ad-BMP-2转染ADSCs、Ad-BMP-7转染AD
目的 观察重症急性胰腺炎(SAP)患者血浆内皮素(ET)水平的变化特点及参麦对其影响.方法 按照平行对照设计原理,将所有60名患者分为常规治疗组(A组)和常规治疗+参麦治疗组(B组).对两组患者的相关临床资料及ET水平进行比较.结果 与B组患者比较,A组患者第2天、第4天ET水平均明显升高[(80.36±11.05)比(98.18±11.83)、(93.63±8.59)比(107.53±9.26)
病理性瘢痕的防治有多种方法,而至今为止尚无一种确切有效的治疗方法,病理性瘢痕的治疗始终是困扰整形外科医生的难题之一,放射治疗是一种较为有效的方法,但常规放射治疗存在许多缺点,近年来,由于重离子的物理学及生物学特性,使其越来越引起人们的重视,因重离子剂量分布具有Bragg峰,能较高吸收剂量区集中于病变部位,从而有效地保护周围的健康组织,是较理想的放疗手段[1-3].本实验旨在观察重离子对人成纤维细胞
目的 比较棘突间Coflex动态内固定术(A组)与腰椎椎弓根螺钉加弹性棒内固定术(B组)两种腰椎非融合内固定手术方式治疗腰椎间盘突出症的早期手术疗效.方法 对2008年3月至2012年3月经郑州大学第一附属医院确诊为单节段腰椎间盘突出(L4/5)的22例患者行腰椎非融合内固定手术治疗并对其进行短期随访调查研究,术后随访时间为(6.87±3.25)个月.术前术后分别用JOA评分和ODI指数对早期临床
组织工程韧带/肌腱是近年研究的热点,理想的组织工程韧带可以保留肌腱/韧带的基本组织结构,提供最佳的干细胞增殖分化环境及肌腱/韧带胶原间的纤维连接,去细胞组织工程肌腱/韧带提供了这种可能,同时避免肌腱/韧带免疫源性及疾病传播风险[1].目前研究较多的是通过应用不同化学试剂进行肌腱/韧带的去细胞,目的是在保留肌腱/韧带的生物学特性的同时去除肌腱细胞成分以达到降低抗原性及保存肌腱/韧带结构完整性的目的.