【摘 要】
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目的 肿瘤坏死因子受体相关因子2(TNF receptor associated factor2,TRAF2)是介导B淋巴细胞表面CD40信号传导的重要因子。目前对TRAF2如何介导CD40核转录因子(NF-kB)信号系统各环节下传还了解不多。本研究利用人B细胞株模型对这方面进行了初步探讨。方法将人类B淋巴细胞株RAMOS细胞转染融合有黄色荧光素(YFP)的野生型(WT-TRAF2)或功能缺失型(
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科,北京100730,中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科,北京100730
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目的 肿瘤坏死因子受体相关因子2(TNF receptor associated factor2,TRAF2)是介导B淋巴细胞表面CD40信号传导的重要因子。目前对TRAF2如何介导CD40核转录因子(NF-kB)信号系统各环节下传还了解不多。本研究利用人B细胞株模型对这方面进行了初步探讨。方法将人类B淋巴细胞株RAMOS细胞转染融合有黄色荧光素(YFP)的野生型(WT-TRAF2)或功能缺失型(DN-TRAF2)TRAF2质粒,过夜培养后用流式细胞仪分离YFP阳性细胞,然后通过激酶实验、Western blot以及ELISA等方法对NF-kB通路的活化进行包括IkB激酶、IkB磷酸化和降解以及NF-kB的细胞核内转录等多方面的研究。结果过度表达WT-TRAF2可诱导IkB激酶(IKKα和IKXi/g)对IKBα(Ser^32.36)的磷酸化和降解以及对p65/RelA的磷酸化和p65、p60、c-Rel的核内转录。然而,过度表达DN-TRAF2只抑制p65的核内转录,而不抑制p50和c-Rel。TRAF2也可通过诱导RAMOS B细胞分泌IgM 而影响其功能。结论TRAF2可选择性地激活人B淋巴细胞CD40介导的NF-kB信号传导系统中的重要因子,在B细胞活化分化中起重要作用。
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