【摘 要】
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目的：建立可同时检测金银花炭疽病病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、白粉病病原菌（Erysiphe lonicera）和褐斑病病原菌（Cercospora rhamni）等3种金银花重要叶部病原菌的三重实时荧光定量PCR快速检测方法。方法：基于金银花炭疽病、白粉病和褐斑病的病原菌的ITS片段序列分别设计特异引物和TaqMan荧光探针，并制备重组质粒建立标准曲线；对
【基金项目】
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山东省高校中药质量控制与全产业链建设协同创新中心（CYLXTCX2021-06）； 山东省创新公共服务平台计划中药分子鉴定公共服务平台（2018JGX111）；
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目的：建立可同时检测金银花炭疽病病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、白粉病病原菌（Erysiphe lonicera）和褐斑病病原菌（Cercospora rhamni）等3种金银花重要叶部病原菌的三重实时荧光定量PCR快速检测方法。方法：基于金银花炭疽病、白粉病和褐斑病的病原菌的ITS片段序列分别设计特异引物和TaqMan荧光探针，并制备重组质粒建立标准曲线；对建立的多重实时荧光定量PCR检测方法进行特异性和灵敏度验证，并对病叶样品进行测试，验证其实用性。结果：本研究建立的多重实时荧光PCR快速检测方法仅针对金银花炭疽病、白粉病和褐斑病病原菌有特异性扩增，且3种病害之间或其它种类病害之间均无交叉反应；最低检测限为2.94×102 copies /μL，比普通PCR法高100倍；利用本方法检测15例有叶部病害症状的金银花病叶，与DNA测序结果相符。结论：本研究所建立的多重实时荧光PCR检测方法特异性强，灵敏度高，为金银花炭疽病、白粉病和褐斑病等主要病害的早期诊断提供技术支持。
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