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目的构建ATP6V182基因野生型及c.1516C〉T突变型和绿色荧光蛋白基因PEGFP的真核共表达载体,为指导ATP6V182基因的功能研究奠定基础。方法应用基因重组技术、限制性内切酶酶切技术、定点诱变及基因测序方法,构建并鉴定野生型(plRES2-EGFP—ATP6V182)和突变型(pIRES2-EGFP—ATP6V182-c.1516C〉T1真核表达质粒。经脂质体介导转染293细胞系,荧光显微镜下观察二者的表达。检测转染细胞内V—ATPase的水解活性和H’转运活性。结果阳性重组子经酶切鉴定野生型