【摘 要】
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背景:糖尿病肾脏疾病是糖尿病最严重和最常见的慢性并发症之一,已经成为导致终末期肾衰竭的重要原因,但其确切的发生发展机制目前尚不清楚,也缺乏精准有效的防治措施.目的:探讨高渗葡萄糖对人肾小管上皮细胞表型变化及干细胞因子表达的影响.方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为正常糖组、高糖刺激组、甘露醇对照组,分别于0,12,24,48 h时间点收集各组细胞,在倒置显微镜下观察细胞形态,采用实时定量PCR和Western blot检测干细胞因子、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白mRNA及蛋白
【机 构】
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青岛大学附属医院,肾病科,山东省青岛市 266003;青岛大学附属医院,检验科,山东省青岛市 266003
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背景:糖尿病肾脏疾病是糖尿病最严重和最常见的慢性并发症之一,已经成为导致终末期肾衰竭的重要原因,但其确切的发生发展机制目前尚不清楚,也缺乏精准有效的防治措施.目的:探讨高渗葡萄糖对人肾小管上皮细胞表型变化及干细胞因子表达的影响.方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为正常糖组、高糖刺激组、甘露醇对照组,分别于0,12,24,48 h时间点收集各组细胞,在倒置显微镜下观察细胞形态,采用实时定量PCR和Western blot检测干细胞因子、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白mRNA及蛋白的表达.结果 与结论:①与正常糖组相比,高糖刺激组肾小管上皮细胞形态发生明显改变,但甘露醇对照组细胞形态与正常生长的肾小管上皮细胞相比无明显改变;②高糖刺激组肾小管上皮细胞中干细胞因子、α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白mRNA及蛋白表达明显高于正常糖组,且呈时间依赖性增加;③肾小管上皮细胞中干细胞因子mRNA及蛋白的表达量与α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白的表达量呈正相关关系;④结果表明,高渗葡萄糖诱导人肾小管上皮细胞高表达干细胞因子,并呈时间依赖性;同时高糖刺激肾小管上皮细胞高表达α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白,说明高糖刺激肾小管上皮细胞转分化并产生大量细胞外基质,促进肾间质纤维化.
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