人肝脏星状细胞的一种改良分离方法

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目的 建立和改良人肝脏星状细胞(human-hepatic stellate cells, hu-HSCs)分离方法,使之适于原代培养和研究.方法 在传统分离HSCs方法的基础上,省略链霉蛋白酶和DNA酶,用EGTA液促细胞解离,再用Ⅳ型胶原酶消化,差速离心去除肝实质细胞,最后用Nycodenz密度梯度离心纯化hu-HSCs,台盼蓝染色法计算细胞产量和进行活力评估,α-SMA、 desmin免疫荧光染色及油红O脂滴染色鉴定细胞纯度.结果 分离得到的原代hu-HSCs数量高达3×106个/克肝脏,纯度达98%;细胞传代后纯度达到100%.结论 改良后的方法经济、快捷、高效,细胞得率及纯度大为提高,有利于建立在原代hu-HSCs基础上的研究.
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