酿酒酵母细胞中β-香树脂醇代谢流调控的研究

来源 :中国中药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lrq22
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
该研究通过使用CRISPR/CAS9基因编辑技术,成功在实验室前期保存的产β-香树脂醇酿酒酵母细胞中敲除编码胞质苹果酸合成酶(citrate synthase,CIT2)和过氧化物酶体柠檬酸合酶(malate synthase,MLS1)的CIT2和MLS1基因,并将编码磷酸葡糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI1)的PGI1基因启动子替换成编码酵母线粒体蛋白细胞色素c氧化酶亚基Ⅶa(cytochrome c oxidase subunit Ⅶa)的核基因Cox9的启动子,从而弱化PGI1基因的表达,调节乙酰辅酶A和胞内NADPH供给,进而调控β-香树脂醇的产量.发酵实验结果表明,删除CIT2基因对β-香树脂醇的产量没有影响;删除MLS1基因后,β-香树脂醇的产量是对照菌株的1.85倍,达到了3.3 mg·L-1.弱化PGI1基因表达后,β-香树脂醇的产量是对照菌株的3.75倍,达6.7 mg·L-1.该研究通过使用CRISPR/CAS9基因敲除技术成功的敲除CIT2和MLS1基因并弱化PGI1基因,提高了β-香树脂醇的产量,也为后期研究β-香树脂醇的酵母异源合成提供一定的借鉴意义.
其他文献
为阐明羌活野生生境针阔混交林与人工栽培条件下土壤水分特征的差异,通过室内Hyprop仪+露点水势仪试验,测定与分析了针阔混交林土壤与大田土壤表层2~7 cm和亚表层10~15 cm的土壤基本理化性质、水分特征曲线及其特征参数等指标。结果表明:①针阔混交林土壤容重为0.33~0.52 g·cm~(-3),显著小于大田土壤的对应值(1.01~1.18 g·cm~(-3))(P<0.05)。有机质含量则
山沉香以其独特的药用价值在我国民族医药应用中发挥着重要作用,现代药理学研究也表明其具有抗心肌缺血、抗菌、抗炎、抗肿瘤、镇痛等功效.山沉香药材取自丁香属植物羽叶丁香
佛司可林(forskolin)是一种结构复杂的半日花烷型植物二萜,基于其作为环磷酸腺苷(cAMP)环化酶激活剂的活性,被用于多种疾病的治疗.天然的佛司可林目前仅存在于濒危植物毛喉鞘
研究光照强度对紫花地丁清热药效的影响.采用角叉菜胶对ICR小鼠进行急性炎症造模,应用热红外成像技术和称重法比较不同光强条件下(100%全光照组、80%全光照组、50%全光照组、35%