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为了研究大鼠“延髓内脏带”投射至缰核之儿茶酚胺能神经元在躯体伤害性刺激后的c－fos表达，使用了WGA－HRP逆行追踪法与抗Fos和抗酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学染色结合的三重标记方法。将WGA－HRP定位注射入右侧缰核，48h后向右前爪跖部皮下注射50ml8％For－malin，2h后动物被处死，用500ml含4％多聚甲醛的0．1mol／L磷酸缓冲液（PB，pH7．4）灌流固定。取出WGA－HRP注射区，脊髓颈段和延髓，切制连续冠状冰冻切片（厚40μm）。首先用四甲基联苯胺（TMB）对WGA－HRP