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通过对秘鲁茎柔鱼及澳洲双柔鱼的线粒体16S rRNA基因片段进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增和序列比对,确定2种柔鱼品种的特异性位点,并由此设计品种特异性引物。利用多重PCR体系对秘鲁茎柔鱼和澳洲双柔鱼进行快速、准确地鉴定和区分,并对该体系的灵敏度进行检验。结果表明:在多重PCR体系下,秘鲁茎柔鱼和澳洲双柔鱼分别扩增出长度400、229 bp的品种特异性条带,2种柔鱼的混合样品则同时扩增出长度400、229 bp的条带;且该多重PCR体系可以检测澳洲双柔