检测核基质蛋白22的电化学免疫传感器的构建

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目的

建立免标记电化学免疫传感器检测膀胱癌标志物核基质蛋白22(NMP22)。

方法

方法学建立与验证研究。收集2017年9月至2019年7月在牡丹江医学院附属红旗医院就诊的20名对照与20例膀胱癌患者的尿液对方法进行评价。采用还原性氧化石墨烯-四乙烯五胺固定金掺杂的金属有机框架材料ZIF8复合膜修饰丝网印刷电极,再将NMP22抗体固定在修饰电极表面,用牛血清白蛋白封闭。采用循环伏安和电化学阻抗法对传感器的组装进行表征。采用差分脉冲伏安法评估传感器的线性范围、回收率、精密度、选择性和稳定性。采用Mann-Whitney U检验分析实验数据。

结果

最佳检测条件下,传感器的线性范围为0.01 ~ 1 000 ng/ml,检出限为3.33 pg/ml(S/N=3),加标回收率在97.65% ~ 107.05%之间,利用其分析尿液中NMP22水平,膀胱癌组[66.03(4.34,91.74)ng/ml]显著高于对照组0.54(0.06,8.84)ng/ml(P=0.001)。

结论

该电化学免疫传感器可以灵敏、快速、准确检测尿液中NMP22,在监测肿瘤标志物方面具有潜在的应用前景。

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