【摘 要】
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单侧寡聚核苷酸嵌套PCR（single oligonucleotide nested PCR，SON—PCR）是一种简便易行的由已知序列克隆其侧翼序列的方法，但该法的第二轮PCR反应引发效率低，而且得到的产物两端含
【机 构】
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中国科学院成都生物研究所,中国科学院研究生院
【基金项目】
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国家"863"高技术资助项目;中国科学院重要方向项目资助课题(KSCX2-YW-G-016)
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单侧寡聚核苷酸嵌套PCR（single oligonucleotide nested PCR，SON—PCR）是一种简便易行的由已知序列克隆其侧翼序列的方法，但该法的第二轮PCR反应引发效率低，而且得到的产物两端含相同的引物序列，不可直接测序．针对该问题，将第二轮PCR改进为两段式扩增，即先以单侧嵌套引物引发5’端做选择性线性扩增，然后再加入第一轮引物特异引发3’端，使特异性和效率都得到很大提高，并可用PCR产物直接测序．分别用已报道的和改进的SON—PCR法克隆Botrytis cinerea羟甲基戊二
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