落新妇苷对永生化人角质形成细胞HaCaT增殖、凋亡的影响及机制探讨

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目的观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞Ha Ca T增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液,培养24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率;收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷+20 ng/m L INF-γ、模型对照组加20 ng/m L INF-γ、空白对照组加DMEM培养液培养24 h,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中的核转录因子κB(NF-κB)p65、骨桥蛋白(OPN)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA。结果落新妇苷在25、50、100、200、400μg/m L时,Ha Ca T细胞增殖抑制率分别为3.06%、26.53%、40.82%、60.20%及61.22%。落新妇苷在50、100、200μg/m L时,观察组Ha Ca T细胞早期凋亡率分别为3.26%、8.24%和15.38%;与空白对照组早期凋亡率(1.33%)比较,P均<0.05。与空白对照组比较,模型对照组NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达增加(P均<0.01);与模型对照组比较,观察组随落新妇苷浓度增加,NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达逐渐降低(P均<0.05)。结论土茯苓提取物落新妇苷能抑制Ha Ca T细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与制抑细胞NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达有关。
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