【摘 要】
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目的 对Alg13基因敲除（knockout, KO）小鼠进行繁育和鉴定，为研究Alg13在癫痫中的作用提供一种理想的动物模型。方法 本研究选用C57BL/6J小鼠，分为Alg13 KO组及野生型（wildtype, WT）组，包括4周龄Alg13 KO小鼠12只（雌雄各6只，体质量6～7 g）,WT小鼠12只（雌雄各6只，体质量7～8 g）,8周龄Alg13 KO雄性小鼠18只（体质量21～23
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金（82001215）； 宁夏科技厅重点研发计划（2020BEB04033）； 宁夏高等学校一流学科建设（宁夏医科大学国内一流建设学科临床医学）资助项目（2020年）～～；
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目的 对Alg13基因敲除（knockout, KO）小鼠进行繁育和鉴定，为研究Alg13在癫痫中的作用提供一种理想的动物模型。方法 本研究选用C57BL/6J小鼠，分为Alg13 KO组及野生型（wildtype, WT）组，包括4周龄Alg13 KO小鼠12只（雌雄各6只，体质量6～7 g）,WT小鼠12只（雌雄各6只，体质量7～8 g）,8周龄Alg13 KO雄性小鼠18只（体质量21～23 g）,WT雄性小鼠18只（体质量22～24 g）。使用PCR、凝胶电泳、DNA测序、TA克隆和蓝白斑筛选综合鉴定Alg13 KO小鼠基因型。免疫组织化学法和免疫印迹法对比验证Alg13 KO小鼠ALG13蛋白的缺失情况。利用同步化视频脑电系统监测Alg13 KO小鼠癫痫发作的行为学表现及脑电特征。免疫印迹分析电压门控钠离子通道α亚基1（sodium channel alpha subunit 1,SCN1A）蛋白表达情况。结果 凝胶电泳、DNA测序及蓝白斑筛选结果均显示Alg13 KO小鼠中存在5个碱基的缺失。与WT组相比，免疫组织化学结果证实Alg13 KO小鼠的皮质、小脑和海马区ALG13表达量显著降低（P＜0.001;P＜0.05;P＜0.001）,且蛋白免疫印迹结果也说明Alg13 KO小鼠的皮质、小脑和海马区ALG13表达更少（P＜0.001）。视频脑电结果显示：部分Alg13 KO小鼠出现频繁的自发性癫痫发作，具有典型癫痫发作的行为学表现和脑电改变；相较于WT组，所有的Alg13 KO组小鼠脑电δ和θ波能量值均显著升高（P＜0.001）。Alg13 KO小鼠海马和皮质中SCN1A的表达水平显著高于WT小鼠（P＜0.05;P＜0.01）。结论 成功繁育Alg13基因敲除小鼠模型，该模型表现出显著的癫痫易感性，可用于遗传异常导致癫痫的机制研究。
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