[摘 要]目的：考察吴茱萸与黄连配伍前后吴茱萸中主要生物碱的含量。方法：高效液相法测定含量。结果：测定组分具有较好的线性关系和分离度，两种生物碱的回收率分别为97.88%，97.15%，RSD（n=5）分别为0.85%，1.08%。结论：吴茱萸与黄连配伍后各种生物碱含量均有不同程度的下降，本法可用于含吴茱萸复方水煎剂中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量测定。
　　[关键词]黄连 吴茱萸 吴茱萸碱 吴茱萸次碱 高效液相法
　　中图分类号：TM 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）10-0011-01
　　黄连常同吴茱萸等中药配伍。与吴茱萸配伍后的复方有左金丸（6∶1），变通丸（1∶1），甘露散（2∶1）等，这些方剂组成均为寒热并用。为进一步探讨二药配伍的机理，研究两者配伍后在制备汤剂中的化学变化，本文采用高效液相法对不同比例的二药配伍前后煎剂中吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量进行了测定。
　　1.药品与试剂
　　乙腈、磷酸及四氢呋喃为色谱纯，甲醇及氯仿均为分析纯，重蒸去离子水。吴茱萸碱及吴茱萸次碱对照品均购自中国药品生物制品检定所，含量分别为97.75%，98.28%。黄连、吴茱萸均购自安徽亳州药业。
　　2.仪器及色谱条件
　　HP 1050型高效液相色谱仪，二极管阵列检测器；色谱柱YWG C18（4.6 mm×200 mm，10μm），大连依利特公司；流动相为乙腈-水（40：60）；流速1ml·min-1；柱温25℃；检测波长290nm。
　　3.方法與结果
　　3.1 样品制备
　　3.1.1黄连、吴茱萸药材分别粉碎（过40目筛）。精密称取吴茱萸粉末1g，加水200 ml煎煮，微沸30mi，纱布过滤，滤渣再加200 ml水煎制，过滤。合并滤液，用水洗涤纱布。滤液及洗涤液合并，水浴蒸至5 ml，加硅藻土2 g，拌匀，80℃干燥，加氯仿30ml，氨水5滴，超声提取3次（每次30 min），合并氯仿提取液，浓缩至干，残渣以氯仿溶解，经氧化铝柱（中性氧化铝1 g，100～200目），氯仿-甲醇（4∶1）20ml洗脱，洗脱液蒸干，甲醇溶解，定容至5 ml容量瓶中（4）。
　　3.1.2吴茱萸用量1g，黄连：吴茱萸=1：1（1），黄连：吴茱萸=2：1（2），黄连：吴茱萸=6：1（3），按3.1.1制成各样品液。另取吴茱萸粉1g，氯仿30ml，氨水5滴超声提取3次，每次30 min（TLC检查无吴茱萸碱及吴茱萸次碱反应），滤过，合并滤液，浓缩，甲醇定容至5 ml容量瓶中（5）。
　　3.1.3 5种样品液进样前适当稀释，0.45μm微孔滤膜过滤，进样量20μl。
　　3.2 标准曲线
　　精密称取吴茱萸碱及吴茱萸次碱对照品各5 mg，置50 ml容量瓶中，甲醇定容。取0.04～0.8 ml于2 ml容量瓶中甲醇定容，过滤，20μl进样（样品及对照品色谱图见图1）。吴茱萸碱和吴茱萸次碱在50～1000 ng，回归方程分别为Y=2.62X-481，r=0.9995；Y=2.75X-457，r=0.9996。
　　3.3 精密度考察
　　同一样品液连续6次进行测定，测得吴茱萸碱及吴茱萸次碱的平均峰面积分别为3865，2076，RSD分别为1.19%，1.68%。
　　3.4 加样回收率
　　吴茱萸药材0.5g，3份，分别加入吴茱萸碱及吴茱萸次碱对照品，按3.1.1制备样品液，测得吴茱萸碱及吴茱萸次碱回收率分别为97.88%，RSD=0.85%；97.15%，RSD=1.08%。
　　3.5 样品测定
　　各样品液测定3次，计算吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量，及每克样品中生物碱的溶出率（见表1）。
　　4.讨论
　　以吴茱萸氯仿提取液含量为100%，从表1可见，二药配伍后吴茱萸中生物碱的含量明显降低，与配伍后黄连中生物碱含量下降是一致的[1]，但配伍不同比例的黄连似对生物碱溶出率的影响不大。
　　参考文献
　　[1] 王浴铭，张君增，朱凤云等.黄连配伍吴茱萸对黄连中主要化学成分的影响.中国中药杂志，1994，19（2）：115。
　　[2] 黄志芳，易进海，吴燕等.吴茱萸药材HPLC含量测定方法的优化.中国中药杂志，2011，36（4）：83。
　　作者简介：
　　刘洪培，性别：女，出生年月日：1985年，8月，籍贯：黑龙江省，单位：哈尔滨誉衡药业股份有限公司，职称：工程师，学历：本科.