【摘 要】
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目的 观察转化生长因子α(TGFα)对鼠视网膜M(u)ller细胞谷氨酸转运体(GLAST)mRNA、蛋白质表达及摄取活性的调控作用.方法 取出生后7～10 d的新生昆明小鼠视网膜组织,体外进行M
【机 构】
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中南大学湘雅医院眼科,长沙,410008
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目的 观察转化生长因子α(TGFα)对鼠视网膜M(u)ller细胞谷氨酸转运体(GLAST)mRNA、蛋白质表达及摄取活性的调控作用.方法 取出生后7～10 d的新生昆明小鼠视网膜组织,体外进行M(u)ller细胞的培养.同一原代细胞的第3～4代细胞培养后随机分为2组:①TGFα干预组:分别加入浓度为50、75、125、150 ng/ml的TGFα,每种浓度3孔;②对照组:仍用含20%胎牛血清的Dulbeccon改良Eagle培养基培养.采用L-3H-谷氨酸摄取分析方法观察不同浓度TGFα对M(u)ller细胞GLAST摄取活性的影响;逆转录聚合酶链反应方法分析M(u)ller细胞GLAST mRNA表达的差异;免疫组织化学染色方法检测M(u)ller细胞GLAST蛋白质表达的变化.结果 随着TGFα浓度的增加,L-3H-谷氨酸的摄取量及GLAST mRNA表达量均逐渐增加,TGFα浓度为125 ng/ml时,L-3H-谷氨酸的摄取量达到最大值,为对照组的266%,同时GLAST mRNA表达量也达到最大值,为对照组的近4倍.免疫组织化学染色显示当TGFα浓度为125 ng/ml时,干预组M(u)ller细胞内的GLAST蛋白表达量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 TGFα可通过上调GLAST mRNA和蛋白质的表达增加视网膜M(u)ller细胞谷氨酸转运体GLAST的摄取活性.
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