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摘要[目的]了解不同影响因子对长春花白粉病菌孢子萌发的影响。[方法]在实验室条件下，系统研究了不同碳、氮源、温度、光照以及pH对长春花白粉病菌无性粉孢子的影响。[结果]适宜孢子萌发的碳源为蔗糖、乳糖、麦芽糖，氮源为L丙氨酸、L亮氨酸；pH在7～10，18 ℃、全光照条件下更适宜其孢子萌发。[结论]为长春花白粉病的有效防控提供了参考。
关键词长春花白粉病；孢子；生物学
中图分类号S436.8+1文献标识码A文章编号0517-6611（2015）06-118-02
长春花（Catharanthus roseus）属于龙胆目夹竹桃科长春花属，多为长江以南地区栽培，因长春花中提取的长春花碱和长春新碱药用价值较高，加之具有较高的观赏价值，吉林地区近几年引种较多，在调查花卉种类时发现了长春花白粉病，经查为吉林地区的新病害，为外来有害生物之一[1-2]。不同影响因子对白粉病菌孢子萌发的影响决定其病害发生的程度，特别是不同碳源、氮源、温度、光照以及pH的影响[3-6]，对其孢子萌发起主导作用。鉴于此，笔者在实验室条件下研究了不同碳源、氮源、温度、光照以及pH对长春花白粉病无性粉孢子的影响，旨在为长春花白粉病的防治提供参考。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1供试病菌。长春花白粉病病菌：于2012年9月15日从吉林市欢喜乡花农的温室大棚中采集长春花白粉病病叶若干待用。
1.1.2供试药剂。蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖、L丙氨酸、L亮氨酸、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵、01% NaOH溶液、01% HCl溶液、 新鲜洋葱、75%乙醇等。
1.2方法
1.2.1样品处理。
1.2.1.1洋葱处理。选用大量洋葱，切成1 cm×1 cm小块，撕下表皮，放在75%乙醇中浸泡48 h，置于无菌水中，连续清洗3次待用。
1.2.1.2病菌处理。取长春花白粉病病叶，用洋葱表皮蘸取白粉病病原孢子，将洋葱表皮放在显微镜低倍镜下进行观察，使单一视野里孢子数不少于30个。
1.2.2不同因素对长春花白粉病病菌的影响。
1.2.2.1不同碳、氮源对长春花白粉病病菌的影响[7-9]。将蘸有孢子的洋葱表皮分别置于含有0.3%蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖溶液的培养皿中，探讨不同碳源对长春花白粉病病菌的影响；将蘸有孢子的洋葱表皮分别置于以0.2%蔗糖溶液为基础培养液的培养皿中，分别加入0.3%L丙氨酸、L亮氨酸、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵，探讨不同氮源对长春花白粉病病菌的影响。每个处理3次重复。每皿3片，使其漂浮在上。室温下培养24 h，在显微镜下观察记录孢子萌发情况。
1.2.2.2不同pH对长春花白粉病病菌的影响。将蘸有孢子的洋葱表皮分别置于以0.1%NaOH和01%HCl配制成pH为4、5、6、7、8、9、10的蔗糖溶液中。每个处理3次重复。其他方法同“1.2.2.1”。
1.2.2.3不同温度对长春花白粉病病菌的影响。将蘸有孢子的洋葱表皮置于0.3%蔗糖溶液培养皿中，每皿3片，使其漂浮在上面，在6～30 ℃下置于生化培养箱（SHP1500、GZH400B、SHP150）培养24 h，在显微镜下观察记录孢子萌发情况。试验温度设为6、10、14、18、22、26、30 ℃，每个处理3次重复。
1.2.2.4不同光照对长春花白粉病病菌的影响。将蘸有孢子的洋葱表皮置于0.3%蔗糖溶液培养皿中，每皿3片，使其漂浮在上面。将培养皿置于生化培养箱（SHP1500、GZH400B）中，在全光照、全黑暗、光暗交替条件下培养24 h，在显微镜下观察记录孢子萌发情况。每个处理3次重复。
2结果与分析
2.1不同碳、氮源对长春花白粉病病菌的影响不同碳源处理中，蔗糖、乳糖、麦芽糖处理间差异不显著，乳糖、麦芽糖、葡萄糖处理间差异不显著，果糖处理与其他处理间差异显著，且与蔗糖、乳糖、麦芽糖处理间差异极显著（图1）；不同氮源处理中，L丙氨酸、L亮氨酸处理间差异不显著，L丙氨酸、L亮氨酸与其他处理间差异极显著（图2）。由此可见，适宜长春花白粉病病菌孢子萌发的碳源为蔗糖、乳糖、麦芽糖，氮源为L丙氨酸、L亮氨酸。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图1不同碳源对长春花白粉病病菌孢子的影响注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图2不同氮源对长春花白粉病病菌孢子的影响2.2不同pH对长春花白粉病病菌的影响由图3可知，pH7、pH8、pH10、pH9处理间差异不显著，pH7、pH8、pH10、pH9与pH5、pH4差异极显著，结果表明偏碱条件下更利于孢子的萌发。由此可见，适宜长春花白粉病病菌孢子萌发的pH范围为7～10。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图3不同pH对长春花白粉病病菌孢子的影响2.3不同温度对长春花白粉病病菌的影响由图4可知，18 ℃与其他处理间差异极显著。由此可见，18 ℃条件下最适宜长春花白粉病病菌孢子的萌发。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图4不同温度对长春花白粉病病菌孢子的影响2.4不同光照对长春花白粉病病菌的影响由图5可知，全光照与光暗交替处理间差异极显著、全光照与全黑暗处理间差异极显著，全黑暗与光暗交替处理间差异极显著。由此可见，光照可以促进长春花白粉病病菌孢子的萌发，且全光照条件更适宜其孢子萌发。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图5不同光照对长春花白粉病病菌孢子的影响3结论与讨论
在实验室条件下，系统研究了不同碳源、氮源、温度、光照以及pH对长春花白粉病无性粉孢子的影响。结果表明，适宜孢子萌发的碳源为蔗糖、乳糖、麦芽糖，氮源为L丙氨酸、L亮氨酸；pH范围为7～10，18 ℃、全光照条件下更适宜其孢子萌发。
吉林地区近几年引种了长春花，并发现长春花白粉病，经查为外来有害生物之一，未见有关文献报道，对于长春花白粉病发病机理还有待于进一步研究。
参考文献
[1] 许志刚.普通植物病理学[M].4版.北京：高等教育出版社，2009.
[2] 王永康，黄荣茂.Y5247防治黄瓜白粉病的田间药效试验[J].山地农业生物学报，2008（2）：64-66.
[3] 左洪波，张艳菊，秦智伟，等.黄瓜种质资源对霜霉病和白粉病的抗病性鉴定[J].东北农业大学学报，2010（8）：59-63.
[4] 马建华，吴晓燕，张蓉，等.黄瓜白粉病的化学防治现状及新防治药剂筛选[J].北方园艺，2007（1）：75-79.
[5] 方中达.植病研究法[M].3版.北京：中国农业出版社，1998.
[6] 刘会宁，李华.欧亚种葡萄对白粉病与霜霉病的抗性研究[J].东北农业大学学报，2004（3）：103-106.
[7] 袁巧丽，杨家荣，高立强.凤仙花白粉寄生孢的生物学特性[J].中国生物防治，2006，22（3）：230-233.
[8] 高锋.吉林省主要瓜类白粉病发生规律及综合防治措施的研究[D].长春：吉林农业大学，2007：84-88.
[9] 张林燕，王玮珍，叶建仁.悬铃木白粉病病原菌及其生物学特性[J].南京农业大学学报：自然科学版，2010，34（1）：135-137.
关键词长春花白粉病；孢子；生物学
中图分类号S436.8+1文献标识码A文章编号0517-6611（2015）06-118-02
长春花（Catharanthus roseus）属于龙胆目夹竹桃科长春花属，多为长江以南地区栽培，因长春花中提取的长春花碱和长春新碱药用价值较高，加之具有较高的观赏价值，吉林地区近几年引种较多，在调查花卉种类时发现了长春花白粉病，经查为吉林地区的新病害，为外来有害生物之一[1-2]。不同影响因子对白粉病菌孢子萌发的影响决定其病害发生的程度，特别是不同碳源、氮源、温度、光照以及pH的影响[3-6]，对其孢子萌发起主导作用。鉴于此，笔者在实验室条件下研究了不同碳源、氮源、温度、光照以及pH对长春花白粉病无性粉孢子的影响，旨在为长春花白粉病的防治提供参考。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1供试病菌。长春花白粉病病菌：于2012年9月15日从吉林市欢喜乡花农的温室大棚中采集长春花白粉病病叶若干待用。
1.1.2供试药剂。蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖、L丙氨酸、L亮氨酸、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵、01% NaOH溶液、01% HCl溶液、 新鲜洋葱、75%乙醇等。
1.2方法
1.2.1样品处理。
1.2.1.1洋葱处理。选用大量洋葱，切成1 cm×1 cm小块，撕下表皮，放在75%乙醇中浸泡48 h，置于无菌水中，连续清洗3次待用。
1.2.1.2病菌处理。取长春花白粉病病叶，用洋葱表皮蘸取白粉病病原孢子，将洋葱表皮放在显微镜低倍镜下进行观察，使单一视野里孢子数不少于30个。
1.2.2不同因素对长春花白粉病病菌的影响。
1.2.2.1不同碳、氮源对长春花白粉病病菌的影响[7-9]。将蘸有孢子的洋葱表皮分别置于含有0.3%蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖溶液的培养皿中，探讨不同碳源对长春花白粉病病菌的影响；将蘸有孢子的洋葱表皮分别置于以0.2%蔗糖溶液为基础培养液的培养皿中，分别加入0.3%L丙氨酸、L亮氨酸、硝酸铵、硝酸钾、硫酸铵，探讨不同氮源对长春花白粉病病菌的影响。每个处理3次重复。每皿3片，使其漂浮在上。室温下培养24 h，在显微镜下观察记录孢子萌发情况。
1.2.2.2不同pH对长春花白粉病病菌的影响。将蘸有孢子的洋葱表皮分别置于以0.1%NaOH和01%HCl配制成pH为4、5、6、7、8、9、10的蔗糖溶液中。每个处理3次重复。其他方法同“1.2.2.1”。
1.2.2.3不同温度对长春花白粉病病菌的影响。将蘸有孢子的洋葱表皮置于0.3%蔗糖溶液培养皿中，每皿3片，使其漂浮在上面，在6～30 ℃下置于生化培养箱（SHP1500、GZH400B、SHP150）培养24 h，在显微镜下观察记录孢子萌发情况。试验温度设为6、10、14、18、22、26、30 ℃，每个处理3次重复。
1.2.2.4不同光照对长春花白粉病病菌的影响。将蘸有孢子的洋葱表皮置于0.3%蔗糖溶液培养皿中，每皿3片，使其漂浮在上面。将培养皿置于生化培养箱（SHP1500、GZH400B）中，在全光照、全黑暗、光暗交替条件下培养24 h，在显微镜下观察记录孢子萌发情况。每个处理3次重复。
2结果与分析
2.1不同碳、氮源对长春花白粉病病菌的影响不同碳源处理中，蔗糖、乳糖、麦芽糖处理间差异不显著，乳糖、麦芽糖、葡萄糖处理间差异不显著，果糖处理与其他处理间差异显著，且与蔗糖、乳糖、麦芽糖处理间差异极显著（图1）；不同氮源处理中，L丙氨酸、L亮氨酸处理间差异不显著，L丙氨酸、L亮氨酸与其他处理间差异极显著（图2）。由此可见，适宜长春花白粉病病菌孢子萌发的碳源为蔗糖、乳糖、麦芽糖，氮源为L丙氨酸、L亮氨酸。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图1不同碳源对长春花白粉病病菌孢子的影响注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图2不同氮源对长春花白粉病病菌孢子的影响2.2不同pH对长春花白粉病病菌的影响由图3可知，pH7、pH8、pH10、pH9处理间差异不显著，pH7、pH8、pH10、pH9与pH5、pH4差异极显著，结果表明偏碱条件下更利于孢子的萌发。由此可见，适宜长春花白粉病病菌孢子萌发的pH范围为7～10。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图3不同pH对长春花白粉病病菌孢子的影响2.3不同温度对长春花白粉病病菌的影响由图4可知，18 ℃与其他处理间差异极显著。由此可见，18 ℃条件下最适宜长春花白粉病病菌孢子的萌发。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图4不同温度对长春花白粉病病菌孢子的影响2.4不同光照对长春花白粉病病菌的影响由图5可知，全光照与光暗交替处理间差异极显著、全光照与全黑暗处理间差异极显著，全黑暗与光暗交替处理间差异极显著。由此可见，光照可以促进长春花白粉病病菌孢子的萌发，且全光照条件更适宜其孢子萌发。
注：柱上不同大、小写字母分别表示处理间在001、005水平差异显著。
图5不同光照对长春花白粉病病菌孢子的影响3结论与讨论
在实验室条件下，系统研究了不同碳源、氮源、温度、光照以及pH对长春花白粉病无性粉孢子的影响。结果表明，适宜孢子萌发的碳源为蔗糖、乳糖、麦芽糖，氮源为L丙氨酸、L亮氨酸；pH范围为7～10，18 ℃、全光照条件下更适宜其孢子萌发。
吉林地区近几年引种了长春花，并发现长春花白粉病，经查为外来有害生物之一，未见有关文献报道，对于长春花白粉病发病机理还有待于进一步研究。
参考文献
[1] 许志刚.普通植物病理学[M].4版.北京：高等教育出版社，2009.
[2] 王永康，黄荣茂.Y5247防治黄瓜白粉病的田间药效试验[J].山地农业生物学报，2008（2）：64-66.
[3] 左洪波，张艳菊，秦智伟，等.黄瓜种质资源对霜霉病和白粉病的抗病性鉴定[J].东北农业大学学报，2010（8）：59-63.
[4] 马建华，吴晓燕，张蓉，等.黄瓜白粉病的化学防治现状及新防治药剂筛选[J].北方园艺，2007（1）：75-79.
[5] 方中达.植病研究法[M].3版.北京：中国农业出版社，1998.
[6] 刘会宁，李华.欧亚种葡萄对白粉病与霜霉病的抗性研究[J].东北农业大学学报，2004（3）：103-106.
[7] 袁巧丽，杨家荣，高立强.凤仙花白粉寄生孢的生物学特性[J].中国生物防治，2006，22（3）：230-233.
[8] 高锋.吉林省主要瓜类白粉病发生规律及综合防治措施的研究[D].长春：吉林农业大学，2007：84-88.
[9] 张林燕，王玮珍，叶建仁.悬铃木白粉病病原菌及其生物学特性[J].南京农业大学学报：自然科学版，2010，34（1）：135-137.