【摘 要】
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背景:近年来国外一些体外实验和动物模型证实经氟达拉滨处理的供者淋巴细胞具有显著的抑制急性移植物抗宿主病的作用,但其作用机制还不十分清楚.目的:通过体外实验观察供者淋
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背景:近年来国外一些体外实验和动物模型证实经氟达拉滨处理的供者淋巴细胞具有显著的抑制急性移植物抗宿主病的作用,但其作用机制还不十分清楚.目的:通过体外实验观察供者淋巴细胞经氟达拉滨培养后的免疫表型变化.设计、时间及地点:观察性细胞学实验,于2007-07/2008-01在常州市第一人民医院血液科完成.材料:供者淋巴细胞标本取自4例行异基因外周血造血干细胞移植的健康供者,氟达拉滨由德国先灵公司提供.方法:将COBO SPECTRA采集的外周血造血干细胞用RPMI1640液洗涤2遍.镜下计数后用含体积分数为0.10FBS的RPMI1640液将细胞密度调整至2×109L-1备用.取其中1 mL的造血干细胞,PBS洗1遍后加入荧光标记的CD3、CD4、CD8、CD44mAb10 μL,对照为Mouse Ig-G1-FITC/PE,低温孵育30min后PBS稀释,流式细胞仪检测.其余细胞以每孔1 mL置于24孔培养板中,再加入终浓度为8mmol/L氟达拉滨将培养板置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养24h.主要观察指标:流式细胞仪检测细胞免疫表型变化.结果:经氟达拉滨培养前及培养24h后供者淋巴细胞中CD4+CD44+T细胞的比例无明显变化,而CDS+CD44+T细胞的比例下降,组间比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论:氟达拉滨可能是通过下调CD44的表达来减少效应性CD8+T细胞向相应组织器官移行,减轻移植后急性移植物抗宿主病的发生.
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