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目的
采用布鲁菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法，探讨布鲁菌的早期、快速检测，为临床医生对布鲁菌感染的诊断提供指导。
方法根据布鲁菌表面蛋白31基因序列设计引物和探针，建立布鲁菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法，并验证反应体系的特异性（布鲁菌标准株16M、544A、1330S、菌苗株104M，参考菌株小肠结肠炎耶尔森菌O: 9、大肠埃希菌O∶157）、重复性（4种不同浓度的标准品），分析反应体系的最低检测限。
结果所建立的检测方法仅能对布鲁菌进行特异性扩增；反应体系中不同底物浓度与循环（Ct）值之间呈良好的线性关系（Y=-2.77X+ 43.19，R2= 0.994 8），反应体系的最低检测限为1 × 103 copies/ml；对布鲁菌标准株16M、544A、1330S与104M的检测结果为阳性，O∶9型小肠结肠炎耶尔森菌、O∶157大肠杆菌的检测结果为阴性；4种不同浓度的标准品和阴性质控品进行4次重复检测，变异系数分别为0.15%、0.16%、0.23%、0.18%。
结论利用实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法，可快速、准确地检出布鲁菌，对临床布鲁菌病的诊断有指导意义。