可经米非司酮诱导的真核表达载体的构建与鉴定

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pennate
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目的:构建一种可经米非司酮诱导的真核表达载体,并用荧光素酶报告基因鉴定其调控作用。方法:利用分子生物学技术,将萤火虫荧光素酶LUC基因和启动子,以及米非司酮调控系统构建成单一的质粒载体pDC-RULUC,为减少两个转录单元之间的潜在干扰,加入了1.2kb的绝缘子。通过PCR扩增和限制性酶切及测序分析鉴定载体的正确性。利用Lipo-fectamine2000试剂盒转染载体pDC-RULUC至体外培养的SW620细胞,将载体pGL3-Control和pGL3-Basic的转染分别设为阳性和阴性对照组,各组均同
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