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目的
探讨RNA上m6A甲基化修饰在三氧化二砷(ATO)抑制肝癌细胞发生中的作用。
方法外购肝癌HepG2细胞培养至对数生长期后,经用20 μM的ATO作用不同时间并取样,进行不同时间段四甲基偶氮唑蓝(MTT)细胞活力、RNA m6A甲基化水平检测,同时利用Western blot对m6A修饰蛋白METTL3、METTL14、FTO、YTHDF1及迁移蛋白Cdc42的表达水平进行检测。
结果随ATO(20 μM)处理时间(0~24 h)增加,HepG2的细胞存活率显著下降(P<0.05),HepG2细胞的RNA m6A甲基化水平显著上升(P<0.05),METTL3、METTL14、FTO、YTHDF1的相对表达量显著增加(均P<0.05),Cdc42的相对表达量显著下降(P<0.05);METTL3和FTO在ATO处理的12~48 h的相对表达量均显著高于0 h[(0.43±0.07),(0.38±0.06)](均P<0.05),METTL14和YTHDF1在ATO处理的6~48 h的相对表达量均显著高于0 h[(0.44±0.08),(0.44±0.07)](均P<0.05),Cdc42在ATO处理的6~48 h的相对表达量均显著低于0 h[(0.76±0.08)](均P<0.05)。
结论随着ATO作用时间增加,HepG2细胞存活率显著下降且RNA m6A甲基化水平显著增加,其中m6A调控酶METTL14、YTHDF1及迁移蛋白Cdc42的早期表达水平差异显著,其对肝癌治疗效果早期评定具有指导意义。