论文部分内容阅读
目的建立实时RT-PCR检测人微血管内皮细胞组织型纤溶酶原激活物(t-PA)mRNA的表达。方法提取人微血管内皮细胞总RNA,经RT-PCR获得靶基因(t—PA)及管家基因(β-actin)的PCR产物。纯化后,作为标准品梯度稀释,采用SYBR GreenⅠ定量PCR检测,建立标准曲线。方法学考核参数为特异性、线性范围、精密度和重复性。分析全反式维甲酸对内皮细胞表达t-PA mRNA的干预效果。结果定量方法特异性好,检测的灵敏度达10^3拷贝,线性范围为10^3~10^10拷贝,循环阈值与PCR体系中起始