【摘 要】
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目的探讨甘氨酸／丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响，为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础。方法采用一步反向PCR法，将编码sBAFF第146位半胱氨酸（Cys）的核苷酸序列置换为
【机 构】
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第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室
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目的探讨甘氨酸／丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响，为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础。方法采用一步反向PCR法，将编码sBAFF第146位半胱氨酸（Cys）的核苷酸序列置换为甘氨酸（G）和丝氨酸（S）的编码序列，测序正确后，亚克隆到高效原核表达载体pQE-80L；以IPTG诱导表达，SDS-PAGE和Western blot检测表达产物，Ni^2＋-NTA柱层析纯化目的蛋白；最后经MTT法检测其促B淋巴细胞增殖活性。结果经一步反向PCR扩增后均得到459bp的DNA片段，经测序分析表
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