枸杞花药蛋白质组双向电泳体系的建立及应用

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采用改良TCA-丙酮沉淀结合Tris-HCl法提取枸杞花药蛋白质,对蛋白质裂解液成分、IPG胶条的pH范围、上样量及染色方法进行了探索。结果表明:(1)采用17cm胶条、400μg的上样量、含有2mol/L硫脲的裂解液,硝酸银染色,可得到重复性好、质量高的枸杞花药蛋白2-DE图谱,枸杞花药蛋白主要集中在pH4-7范围。(2)采用该体系分析了‘宁杞1号’和‘宁杞5号’四分体时期花药蛋白,并利用PDQuest8.0软件在pH4-7的2-DE图谱上检测到500多个蛋白点,其中差异表达嚣大于2倍的蛋白有25个。
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