【摘 要】
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利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经DES-BSA免疫的BALB/c小鼠脾细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库。通过重叠延伸PCR（SOE-
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利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经DES-BSA免疫的BALB/c小鼠脾细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库。通过重叠延伸PCR（SOE-PCR）,以（Gly4Ser）3为连接肽,将VH基因和VL基因连接成VH-Linker-VL,在SfiⅠ＋NotⅠ酶切位点定向插入pCANTAB-5E噬菌体载体,转化大肠杆菌TG1后,经M13KO7辅助噬菌体拯救,构建成了全套抗己烯雌酚单链抗体表面展示文库。噬菌体中scFv基因的插入率为87.5%,经M13KO7
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