【摘 要】
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目的 探讨抑制转化生长因子β(TGF-β)表达对小鼠脊髓损伤的修复作用.方法 将12只小鼠分为3组:治疗组、对照组和阴性对照组,4只/组,重复实验2次.治疗组通过对脊髓损伤半切模型小鼠进行腹腔注射TGF-β中和抗体(1D11)来抑制TGF-β的表达量;对照组小鼠注射载体抗体(13C4)作为对照,损伤后3次/周,每次25μL/只;阴性对照组未做半切损伤,4周后心脏灌注取材,选取损伤部位上下1～2 cm脊髓进行包埋,损伤区域的免疫荧光染色通过FSP1观察成纤维细胞募集,通过Fibronectin来观察纤连蛋白
【机 构】
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华中科技大学协和深圳医院脊柱外科,广东 深圳 518000;天津医科大学总医院骨科,天津 300052
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目的 探讨抑制转化生长因子β(TGF-β)表达对小鼠脊髓损伤的修复作用.方法 将12只小鼠分为3组:治疗组、对照组和阴性对照组,4只/组,重复实验2次.治疗组通过对脊髓损伤半切模型小鼠进行腹腔注射TGF-β中和抗体(1D11)来抑制TGF-β的表达量;对照组小鼠注射载体抗体(13C4)作为对照,损伤后3次/周,每次25μL/只;阴性对照组未做半切损伤,4周后心脏灌注取材,选取损伤部位上下1～2 cm脊髓进行包埋,损伤区域的免疫荧光染色通过FSP1观察成纤维细胞募集,通过Fibronectin来观察纤连蛋白沉积以及通过PGP9.5来观察神经学恢复情况.最后选择脊髓损伤钳夹模型来进一步验证,使用免疫荧光染色通过5-HT来观察轴突存活情况以及通过GFAP来观察星形胶质细胞分布情况.结果 在脊髓损伤半切模型中,与对照组相比,治疗组损伤区域中成纤维细胞募集减少(P<0.05),纤连蛋白沉积减少(P<0.05),神经学功能PGP9.5染色有所恢复(P<0.05).在脊髓损伤钳夹模型中,1D11组与13C4组相比,5-HT阳性的轴突存活增加且下行距离延伸,GFAP阳性星形胶质细胞在损伤区域内分布数量增加(P<0.05).结论 抑制脊髓损伤后TGF-β的表达量可以减少成纤维细胞的募集和纤连蛋白的沉淀,从而促进脊髓损伤后神经学功能恢复来修复脊髓损伤.
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