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摘要：当前，大量的使用农药不仅引发了环境污染问题，而且对人类的健康也造成了影响，农药的使用深受人们的高度重视，食品当中的农药残留检测也被纳入到重点工作中来。因为需要检测的样品数量增多，对农药残留检测的灵敏度提出了更高的要求，为了提高检测的效率与精确度，应当采取科学的检测方法，加大免疫分析法的应用力度，为检测工作的开展提供可靠的保障。因此，本文针对免疫分析法在水稻农药残留检测中的应用及前景进行了分析，从而为提升水稻农药残留检测的质量奠定良好的基础。
关键词：免疫分析法；水稻；农药残留；抗原
一、免疫分析法的基本类型
所谓免疫分析法，其指的是将抗原和抗体的特异性结合在一起，将其作为基础，利用生物化学检测器，对蛋白质和化合物等实施定量与定性的分析。根据标记物区分的类型，对免疫分析法进行分类，抗原分成酶免疫分析法（EIA）和荧光免疫分析法（RIA）等，再对这些方法进行延伸，形成了流动免注射免疫法，以及免疫传感器等，在农药免疫分析法中，比较重要的是酶标记免疫分析法[1]。
对于酶免疫分析法而言，其用酶標记抗原或者是抗体，因为抗原与抗议存在特异性免疫反应，将其与酶的高效催化作用有机的整合在一起，因为酶标记抗体的保存时间比较长，敏感度比较高，所以显示的结果更加准确，为农药残留检测提供了便利。另外，根据抗体与抗原是否存在竞争结合的情况，将免疫分析法分成两大类型，主要是竞争性ELISA法与非竞争性ELISA法。通常情况下，对一般目标检测物是大分子，进行检测时，采用非竞争性ELISA法；如果是小分子目标检测物，应当采取竞争性ELISA法，由于大部分农药的分子量在1000以下，因而不具备免疫原性，在制备抗体时，开展农药残留免疫检测过程中，都应当运用竞争性酶联免疫反应，从而达到最佳的检测效果。
二、免疫分析法的主要方法
（一）抗原包被直接竞争法
目前，对于抗原包被直接竞争法而言，其是免疫分析法的主要方法主要，简称为E-Ab法，通过将人工抗原包被到酶标板之上，再加入酶标记的抗体，以及待检测的农药产品，基于竞争性结合，反应之后再洗涤，在反应板上，只存留了和包被抗原结合的酶标抗体，然后加入酶的底物，产生了有色物质，利用比色法，对需要检测的农药实施定量与定性测定。
（二）间接竞争ELISA法
间接竞争ELISA法指的是运用人工抗原包被酶反应板后，加入了抗血清与需要检测的农药，能够进行竞争性结合反应，将反应板进行洗涤，留下了和包被原结合的抗体，即第一抗体，加入酶标记的第二抗体，和第一抗体予以选择性的结合，当洗涤之后，加入了酶的底物。对于酶催化反应的产物量，和被结合的第一抗体、酶标第二抗体量呈正比，与需要检测样品相比，农药量呈现反比。总之，免疫分析法是一种有效的方法，在农药期间，得到了广泛的应用，当然，在科学技术水平不断提升的背景下，也应当明确免疫分析法的发展方向，对前景进行展望，从而确保免疫分析法的技术水平得到进一步提升。
三、免疫分析法在水稻农药残留检测中的应用
（一）在杀菌剂残留检测中的应用
目前，在稻农药残留检测过程中，为了保证检测的效果，应用到了免疫分析法，其中，酶联免疫吸附法是免疫分析法的一种，在使用该方法时，利用到特克多光谱杀菌剂，提取水稻样品，检测限是0.2ng/ml，与以往的检测结果相比，检测结果更加准确，从而为增强水稻农药残留检测的质量发挥了至关重要的作用[2]。
（二）除草剂残留检测中应用免疫分析法
在对除草剂残留进行检测期间，运用到了免疫分析法，通过采取制备的2，4-D多克隆抗体，对土壤与食品中的2，4-D的残留实施检测，检测的限已经达到了1ng/ml。同时，对吡草胺加以检测，检测限制达到了0. 05ng/ml。另外，在对除草剂实施免疫分析过程中，通过对免疫分析方法，以及条件等进行筛选，构建了三种农药免疫分析的方法，也就是E-Ab直接ELISA法、间接ELISA法，和E-H直接ELISA法，针对氯黄隆标样进行测定，检测限在0. 01～ 0. 06ng/ml范围之内[3]。
（三）检测杀虫剂残留
在对水稻进行杀虫时，会利用到杀虫剂，常见的杀虫剂包含了有机磷杀虫剂和拟除虫菊酯杀虫剂等，这些都是农药中较大的一类，无论是对环境，还是对农产品均造成一定的影响，都产生了严重的影响。从目前看，有机磷杀虫剂是使用最为广泛法一类杀虫剂，在对水稻残留的硫磷予以检测时，利用了免疫分析法，通过设计、合成了半抗原，再与不同的载体蛋白进行偶联系，继而产生了人工抗原，实施免疫指之后，可以得到甲基对磷酸的高效抗体，继而促进对水稻农药残留的检测。近年来，拟除虫菊酯类农药发展的速度比较快，拟除虫菊酯类农药常常和有机磷农药混合使用，对检测难度大的农药残留时，具有十分显著的效果。通过运用自制的具有特异性，而且另名都较高的氰戊菊酯抗体，实施ELISA分析，检测的结果在30± 6. 2μg/ L之间。此外，该类农药和其他拟除虫菊酯类农药几乎没有交叉反应，取得了显著的效果，对水稻农药残留检测中的有效应用奠定了良好的基础。
四、免疫分析法在水稻农药残留检测中应用的前景展望
为了向人们提供安全、可靠的水稻农产品，应当降低农药残留，继而避免对消费者的健康构成威胁。在实际开展水稻农药残留检测过程中，为了增强检测的精确度，需要采取高效、灵敏的农药残留检测方法，以此提高水稻农药残留检测的质量[4]。当然，研发比较灵敏和快速的水稻农药残留检测方法显得尤为重要，尽管免疫分析法还有很多地方需要完善，但其也有多的优势，在水稻农药残留检测期间，其发挥了极其重要的作用，对进一步提高水稻药残留检测的精确度具有主要的意义。在环境问题日益突出的条件下，水稻农药残留深受关注，当前，免疫分析法是比较具有竞争力的分析检测技术，由此可知，在未来的阶段，免疫分析法必然取得良好的发展，而且越来越健全，而且和其他的技术有机的整合在一起为重要的发展反向，从而在水稻农药检测中发挥其最大的作用，所以免疫分析法具有良好的发展前景。
结束语：
综上所述，食品安全和环境是社会比较关注的问题，所以农药检测工作尤为重要。免疫分析法作为一种有效的检测方法，在水稻农药残留检测过程中，通过应用到免疫分析法，对提升检测的精确度发挥了至关重要的作用。随着科学技术水平的不断提升，免疫分析法也应当逐步的完善，并明确日后的发展方向，从而不断的提升免疫分析法的检测精确度，为水稻农药残留工作的高效开展创造有利的条件。
参考文献
[1]丁明伟，黄荣茂，金林红，等.烯效唑的色谱分析方法[J].山地农业生物学报，2009，28（6）：559-562.
[2]水稻细菌性条斑病种子带菌检测技术研究[Z].浙江省农业科学院植物保护研究所.
[3]王慧敏.甲基对硫磷特异性单克隆抗体和单链抗体的制备及应用[D].山东：山东农业大学，2017.
[4]闫旭.农药多残留酶联免疫分析方法研究[D].江苏：南京农业大学，2013.
（作者单位：哈尔滨市粮食质量监测站）
关键词：免疫分析法；水稻；农药残留；抗原
一、免疫分析法的基本类型
所谓免疫分析法，其指的是将抗原和抗体的特异性结合在一起，将其作为基础，利用生物化学检测器，对蛋白质和化合物等实施定量与定性的分析。根据标记物区分的类型，对免疫分析法进行分类，抗原分成酶免疫分析法（EIA）和荧光免疫分析法（RIA）等，再对这些方法进行延伸，形成了流动免注射免疫法，以及免疫传感器等，在农药免疫分析法中，比较重要的是酶标记免疫分析法[1]。
对于酶免疫分析法而言，其用酶標记抗原或者是抗体，因为抗原与抗议存在特异性免疫反应，将其与酶的高效催化作用有机的整合在一起，因为酶标记抗体的保存时间比较长，敏感度比较高，所以显示的结果更加准确，为农药残留检测提供了便利。另外，根据抗体与抗原是否存在竞争结合的情况，将免疫分析法分成两大类型，主要是竞争性ELISA法与非竞争性ELISA法。通常情况下，对一般目标检测物是大分子，进行检测时，采用非竞争性ELISA法；如果是小分子目标检测物，应当采取竞争性ELISA法，由于大部分农药的分子量在1000以下，因而不具备免疫原性，在制备抗体时，开展农药残留免疫检测过程中，都应当运用竞争性酶联免疫反应，从而达到最佳的检测效果。
二、免疫分析法的主要方法
（一）抗原包被直接竞争法
目前，对于抗原包被直接竞争法而言，其是免疫分析法的主要方法主要，简称为E-Ab法，通过将人工抗原包被到酶标板之上，再加入酶标记的抗体，以及待检测的农药产品，基于竞争性结合，反应之后再洗涤，在反应板上，只存留了和包被抗原结合的酶标抗体，然后加入酶的底物，产生了有色物质，利用比色法，对需要检测的农药实施定量与定性测定。
（二）间接竞争ELISA法
间接竞争ELISA法指的是运用人工抗原包被酶反应板后，加入了抗血清与需要检测的农药，能够进行竞争性结合反应，将反应板进行洗涤，留下了和包被原结合的抗体，即第一抗体，加入酶标记的第二抗体，和第一抗体予以选择性的结合，当洗涤之后，加入了酶的底物。对于酶催化反应的产物量，和被结合的第一抗体、酶标第二抗体量呈正比，与需要检测样品相比，农药量呈现反比。总之，免疫分析法是一种有效的方法，在农药期间，得到了广泛的应用，当然，在科学技术水平不断提升的背景下，也应当明确免疫分析法的发展方向，对前景进行展望，从而确保免疫分析法的技术水平得到进一步提升。
三、免疫分析法在水稻农药残留检测中的应用
（一）在杀菌剂残留检测中的应用
目前，在稻农药残留检测过程中，为了保证检测的效果，应用到了免疫分析法，其中，酶联免疫吸附法是免疫分析法的一种，在使用该方法时，利用到特克多光谱杀菌剂，提取水稻样品，检测限是0.2ng/ml，与以往的检测结果相比，检测结果更加准确，从而为增强水稻农药残留检测的质量发挥了至关重要的作用[2]。
（二）除草剂残留检测中应用免疫分析法
在对除草剂残留进行检测期间，运用到了免疫分析法，通过采取制备的2，4-D多克隆抗体，对土壤与食品中的2，4-D的残留实施检测，检测的限已经达到了1ng/ml。同时，对吡草胺加以检测，检测限制达到了0. 05ng/ml。另外，在对除草剂实施免疫分析过程中，通过对免疫分析方法，以及条件等进行筛选，构建了三种农药免疫分析的方法，也就是E-Ab直接ELISA法、间接ELISA法，和E-H直接ELISA法，针对氯黄隆标样进行测定，检测限在0. 01～ 0. 06ng/ml范围之内[3]。
（三）检测杀虫剂残留
在对水稻进行杀虫时，会利用到杀虫剂，常见的杀虫剂包含了有机磷杀虫剂和拟除虫菊酯杀虫剂等，这些都是农药中较大的一类，无论是对环境，还是对农产品均造成一定的影响，都产生了严重的影响。从目前看，有机磷杀虫剂是使用最为广泛法一类杀虫剂，在对水稻残留的硫磷予以检测时，利用了免疫分析法，通过设计、合成了半抗原，再与不同的载体蛋白进行偶联系，继而产生了人工抗原，实施免疫指之后，可以得到甲基对磷酸的高效抗体，继而促进对水稻农药残留的检测。近年来，拟除虫菊酯类农药发展的速度比较快，拟除虫菊酯类农药常常和有机磷农药混合使用，对检测难度大的农药残留时，具有十分显著的效果。通过运用自制的具有特异性，而且另名都较高的氰戊菊酯抗体，实施ELISA分析，检测的结果在30± 6. 2μg/ L之间。此外，该类农药和其他拟除虫菊酯类农药几乎没有交叉反应，取得了显著的效果，对水稻农药残留检测中的有效应用奠定了良好的基础。
四、免疫分析法在水稻农药残留检测中应用的前景展望
为了向人们提供安全、可靠的水稻农产品，应当降低农药残留，继而避免对消费者的健康构成威胁。在实际开展水稻农药残留检测过程中，为了增强检测的精确度，需要采取高效、灵敏的农药残留检测方法，以此提高水稻农药残留检测的质量[4]。当然，研发比较灵敏和快速的水稻农药残留检测方法显得尤为重要，尽管免疫分析法还有很多地方需要完善，但其也有多的优势，在水稻农药残留检测期间，其发挥了极其重要的作用，对进一步提高水稻药残留检测的精确度具有主要的意义。在环境问题日益突出的条件下，水稻农药残留深受关注，当前，免疫分析法是比较具有竞争力的分析检测技术，由此可知，在未来的阶段，免疫分析法必然取得良好的发展，而且越来越健全，而且和其他的技术有机的整合在一起为重要的发展反向，从而在水稻农药检测中发挥其最大的作用，所以免疫分析法具有良好的发展前景。
结束语：
综上所述，食品安全和环境是社会比较关注的问题，所以农药检测工作尤为重要。免疫分析法作为一种有效的检测方法，在水稻农药残留检测过程中，通过应用到免疫分析法，对提升检测的精确度发挥了至关重要的作用。随着科学技术水平的不断提升，免疫分析法也应当逐步的完善，并明确日后的发展方向，从而不断的提升免疫分析法的检测精确度，为水稻农药残留工作的高效开展创造有利的条件。
参考文献
[1]丁明伟，黄荣茂，金林红，等.烯效唑的色谱分析方法[J].山地农业生物学报，2009，28（6）：559-562.
[2]水稻细菌性条斑病种子带菌检测技术研究[Z].浙江省农业科学院植物保护研究所.
[3]王慧敏.甲基对硫磷特异性单克隆抗体和单链抗体的制备及应用[D].山东：山东农业大学，2017.
[4]闫旭.农药多残留酶联免疫分析方法研究[D].江苏：南京农业大学，2013.
（作者单位：哈尔滨市粮食质量监测站）