【摘 要】
：
目的:构建大鼠Ⅰ型大麻素受体(CB1)真核基因表达载体,并检测其在细胞中的表达情况。方法:从大鼠海马组织中提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出CB1基因片段,产物连
【机 构】
：
重庆三峡中心医院药学部,重庆三峡医药高等专科学校第一附属医院神经外科,重庆医科大学实验动物中心
论文部分内容阅读
目的:构建大鼠Ⅰ型大麻素受体(CB1)真核基因表达载体,并检测其在细胞中的表达情况。方法:从大鼠海马组织中提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出CB1基因片段,产物连接到p MD18-T载体上。阳性实验筛选出阳性克隆,经Eco RⅠ、Bam HⅠ双酶切及测序鉴定后,将其连接到载体pc DNA 3.1(+)中,构建质粒载体pc DNA3.1(+)-CB1,脂质体转染原代人胚肾293细胞(HEK293细胞)。用Western blot实验鉴定细胞中CB1蛋白的表达,用免疫荧光细胞染色联合激光扫描共聚焦法检测其在细胞中表达的部位。结果:采用RT-PCR成功获得大鼠CB1基因,PCR扩增得到1 500 bp左右的CB1基因片段,双酶切鉴定及DNA测序证实质粒载体pc DNA3.1(+)-CB1构建成功。Western blot实验、免疫荧光细胞染色联合激光扫描共聚焦法证实载体pc DNA3.1(+)-CB1能在HEK293细胞中表达,且表达产物主要分布在细胞膜表面和细胞质中。结论:构建的pc DNA3.1(+)-CB1表达载体能成功转入真核HEK293细胞,并在细胞膜表面和细胞质中表达CB1蛋白。
其他文献
引信火工品数据库是“十五”武器装备预先研究共用技术项目(4B05010204)《机电引信仿真及虚拟样机技术》中的主要研究内容的一部分。 本文在对引信火工品数据库系统的功能
<正>莲花松轮中远海运特运股份有限公司2017年第一艘航行北极的船舶莲花松轮于北京时间8月23日12:00时结束破冰引航,安然通过冰区。该轮于8月22日15:00时与破冰船会合后,跟随
目的总结PICC置管后接触性皮炎的原因及有效的护理措施。方法回顾分析我院2018年发生的38例PICC置管后接触性皮炎的原因、护理方法及护理效果。结论专业人员进行PICC导管护理
本文在简述光纤制导导弹系统组成原理后，提出一个在现有制导传输技术基础上如何将光纤制导导弹系统的上行线传输作用距离提高到远程(≥60km)的问题。并从信息传输理论的角度提
提出了处理含Ｓ、ＣＮ工业污水行之有效的方法——内电解法，对其除污原理、除污效果和实验条件进行了综合分析。
调查报告是实际工作中经常使用的一种应用文体，在经济建设和社会发展中所起的作用日益突出。文章论述了处理好调查与研究、主观与客观、事与理、材料与观点这四对关系对调查报
随着世界战争格局的转变,小规模的地区冲突与反恐斗争已成为现代战争的主体。素有“地面战神”之称的装甲战车,重新成为战争的主角。然而由于现代火药和制导技术的不断发展,
研究目的:老年人由于年龄段的差异,身体素质差异很大,何种锻炼方式更有利于提高老年人的平衡能力有待进一步研究。本研究旨在通过规律健身气功·八段锦锻炼,探讨健身气功·八
本文围绕提高燃烧型抗红外发烟剂的红外消光性能,设计了以六氯代苯为发烟物的系列发烟剂配方,并用多通道红外辐射计对其红外透过率进行了测试。得出在配方中金属氧化物作氧化
采用西门子200系列PLC和国产组态软件组态王，构建了矿井主扇风机的监控系统，实现了在上位机上对主扇风机的起、停、正反风的自动化控制和运行参数、风门状态的实时监测。