抗菌肽Cecropin D在毕赤酵母中的表达、纯化及活性鉴定

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiekoala
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目的在毕赤酵母GS115中表达抗菌肽Ceempin D,并检测其抗菌活性。方法根据毕赤酵母密码子的偏爱性,人工合成6条寡聚核苷酸片段,经磷酸化、退火、连接并克隆人酵母表达载体pPIC9K。重组表达质粒pPIC9K-D转化至毕赤酵母菌GS115,经G418筛选,阳性高拷贝克隆用0.5%的甲醇诱导表达,表达产物经CM—Sepharose层析柱纯化,Tricine-sDS.PAGE分析,琼脂糖扩散法和比浊法测定其抗菌活性。结果经Tricine-SDS-PAGE检测,在相对分子质量3900左右处可见目的蛋白表达条
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