【摘 要】
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目的 构建人MCHR1真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定转染的HEK293细胞系。方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将
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目的 构建人MCHR1真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定转染的HEK293细胞系。方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HEK293细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HEK293细胞系,用RT-PCR、Western-blot检测MCHR1的表达。结果 构建了pcDNA3.1(+)/MCHR1真核表达载体,建立了稳定转染的HEK29
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